rna干扰的生物学原理

2017-03-20 14:20

  rna干扰是指在进化过程中高度保留的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的景象,rna干扰基因缄默沉静,首要有转录前水平的基因缄默沉静(TGS)和转录后水平的基因缄默沉静(PTGS)两类:TGS是指因为DNA润饰或染色体异染色质化等要素使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会一起致使TGS和PTGS。
  
  RNA搅扰的原理:
  
  1、病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并使用宿主细胞进行转录时,常发生一些dsRNA。至于dsRNA的发生机制我也没搞懂。
  
  2、宿主细胞对这些异常的dsRNA发生反响,核酸内切酶Dicer将dsRNA切开成多个具有特定长度和构造的小片段RNA(大概21~23 bp),即siRNA。
  
  3、siRNA在细胞内RNA解旋酶的效果下解链成公理链和反义链,反义siRNA再与体内一些酶(包含内切酶、外切酶、解旋酶等)联系构成RNA诱导的缄默沉静复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。
  
  4、RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性联系,RISC具有核酸酶的功用,在联系部位的两头切开mRNA,使mRNA降解。
  
  5、siRNA还可作为引物与mRNA联系并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)效果下组成更多新的dsRNA,新组成的dsRNA再由Dicer切开发生很多的次级siRNA,从而使RNAi的效果进一步扩大,最终将靶mRNA彻底降解。
  
  6、到达基因缄默沉静的意图。

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